凝膠滲透色譜具有較多優(yōu)勢

　　凝膠滲透色譜分析法或尺寸排除色譜法（GPC/SEC）是高分子、大分子和蛋白質(zhì)常用的主要分析手段，其中zui主要的原因是它能對分子量和分子量分布數(shù)據(jù)進行定量表征。人們通常將上述分析方法分為兩步。*步：利用含有適當特性微孔填充材料的色譜柱對溶解樣品按照分子大小/體積進行分離；第二步：利用適當?shù)臋z測儀器對被分離的樣品進行分析。

　　GPC/SEC 系統(tǒng)的傳統(tǒng)配置為：采用單個折光指數(shù) (RI) 檢測器對濃度進行測量，在這種配置下，利用參照校準數(shù)據(jù)可以得到相對分子量分布數(shù)據(jù)。這對某些常見的高分子材料和/或質(zhì)量控制比較適合，凝膠滲透色譜但分析者越來越多地傾向于采用具有如下特點的多檢測儀組合GPC/SEC 系統(tǒng)：

　　● 無需色譜柱校準即可取得所有材料的數(shù)據(jù)

　　● 極大提高數(shù)據(jù)處理效果

　　目前市面上有很多可用于GPC/SEC 的檢測儀。由于分析具有兩階段的特性，因此在選擇合適的系統(tǒng)時有很多問題需要考慮。*一體化的單一檢測器固然有優(yōu)勢，但我認為它與選擇*檢測儀組合解決方案相比只能說是次優(yōu)方案。對檢測器的選擇進行優(yōu)化是一種既直接又的方法，具有較多優(yōu)勢，比如可以僅通過一次實驗就獲得能確定分子量、流體力學尺寸和分子結(jié)構(gòu)的表征。

　　這就提出了一個問題：如何才能為以應(yīng)用為基礎(chǔ)發(fā)掘*的檢測器系統(tǒng)？這個問題牽涉很廣，但卻為我們初步了解不同檢測器的優(yōu)勢提供了一個良好的契機。

　　首先從粘度計開始，凝膠滲透色譜可以測量各種粘度參數(shù)，而對于聚合物溶液而言，它可以建立起與樣品分子量之間的關(guān)聯(lián)。當與RI 檢測器一同使用時，粘度計可以實現(xiàn)普氏校準，系統(tǒng)無需再尋找與待測樣品十分接近的標準樣品，同時也提高了分子量分布數(shù)據(jù)的完整性。粘度測量還可以確定結(jié)構(gòu)方面的信息，比如可以對聚合物分支進行定量分析。

　　接下來讓我們來看看靜態(tài)光散射檢測器，它們可以對分子量進行直接測量。由于市場上存在著各種不同的檢測儀，如LALS、RALS 和 MALS，因此問題就開始變得復(fù)雜了。上述所有這些檢測儀都通過測量散射光的能量來得到分子量，但散射光能量隨角度各不相同，比如，小角度光散射檢測儀(LALS) 以7度的角度檢測入射光線，直角光散射 (RALS) 以90度測量入射光線，此外還有多角度測量光散射儀 (MALS)。

　　上述儀器各有優(yōu)勢，本文不一一展開論述，但我們需要了解的關(guān)鍵是它們各自的特點？對大分子而言(>12nm)，其產(chǎn)生的散射光強度的變化與入射光線角度呈函數(shù)關(guān)系。得到分子量的數(shù)學方法是利用入射光線在0度 時的散射光強度通過銳利散射方程得到分子量，而0 度角的散射光是無法直接測量的，因此人們開發(fā)了專門針對檢測這些大分子的方法。

　　LALS 檢測儀以非常接近入射光線的角度進行測量，從而無需另行外推計算。MALS 檢測儀則進行多個角度的測量，并利用測量結(jié)果外推得到0度 時的散射光強度。將各種技術(shù)放在一起探討已成為行業(yè)的一種趨勢和偏好，凝膠滲透色譜例如，SEC-MALS 已成為蛋白質(zhì)表征的標準方法，而RALS 則被認為是基于分子大小的蛋白質(zhì)表征的*選擇。

　　動態(tài)光散射技術(shù) (DLS) 進一步豐富了光散射檢測儀的選擇范圍，它是一種廣泛應(yīng)用的測定納米級粒徑范圍的粒度測量手段，對某些GPC/SEC 用戶非常有效。該技術(shù)的主要應(yīng)用領(lǐng)域是蛋白質(zhì)分析，它可以對流體力學分子半徑進行測量。DLS 檢測儀同時還能進行靜態(tài)光散射測量，由此開啟了進行分子量測量的可能。

　　zui后還有一種同樣重要的技術(shù)可供選擇，就是基于紫外光技術(shù)的單波長或多波長檢測儀。對于含有染色體的樣品來說，單波長紫外光檢測儀是更的測量方法，用以替代RI (折射系數(shù)) 檢測儀對濃度進行測量。不過它可與RI 檢測儀相結(jié)合來確定各流出組分中特定成分的比例，這對于評單體濃度具有*的價值。PDA 檢測器測量多波長的能力則進一步拓展了檢測儀的靈活性和功能性。

　　凝膠滲透色譜本文是對當前GPC/SEC 技術(shù)的簡單總結(jié)，其中有兩點筆者認為對于優(yōu)化檢測儀的應(yīng)用非常重要。首先應(yīng)當認識到，檢測器技術(shù)的發(fā)展對GPC/SEC 潛在價值所帶來的影響至關(guān)重要；其次，要選擇適合公司應(yīng)用的檢測儀組合，很重要的一點是要獲得一些技術(shù)認知并采用符合邏輯的選擇方法。在GPC/SEC 的這一方面樹立正確的觀點，是對今后改善長期檢測效率和以的方式進行數(shù)據(jù)采集的關(guān)鍵。