1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑. 實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染.
2. 加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的 "預孵育"時間，從而明顯地影 響到測量值的準確性及重復性.一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在 10 分 鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣.
3. 孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態；同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度.
4. 洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響zui后的酶標儀讀數.
5. 試劑配制：Detection A 及 Detection B 在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或 瓶蓋的液體沉積到管底.標準品，檢測溶液 A 工作液，檢測溶液 B 工作液請依據所需的量 配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆.
請配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液 A 時，一次不要小于 10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃 度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品，檢測溶液 A 工作液或檢測溶液 B 工作液.
6. 反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔 10 分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數.
7. 底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性. 如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數.