 |
廣州同譜實驗儀器有限公司
主營產品： kromasil色譜柱,通用石墨管,SPE固相萃取小柱 |
10
聯系電話
|
廣州同譜實驗儀器有限公司
主營產品： kromasil色譜柱,通用石墨管,SPE固相萃取小柱 |
聯系電話
2021-5-7 閱讀(4722)
應用簡介
本實驗采用固相萃取結合高效液相色譜的方法，建立了辣椒油中羅丹明B的檢測方法。樣品經20%丙酮的正己烷溶液（V/V）提取，Cleanert Alumina-N固相萃取柱凈化，Venusil MP C18色譜柱（4.6 × 150 mm，5 µm，100 Å）分離，水和甲醇為流動相進行洗脫，外標法進行定量。結果表明，羅丹明B添加量為0.05 mg/kg時，回收率在90% ~ 100%之間，能夠滿足檢測要求。
羅丹明B(Rhodamine B)又稱玫瑰紅B,或堿性玫瑰精，俗稱花粉紅，是一種具有鮮桃紅色的人工合成的染料。經老鼠試驗發現，羅丹明B會引致皮下組織生肉瘤，被懷疑是致癌物質。羅丹明B在溶液中有強烈的熒光，用作實驗室中細胞熒光染色劑、有色玻璃、特色*和爆竹等行業。曾經用作食品添加劑，但后來實驗證明羅丹明B會致癌，現在已不允許用作食品染色。
因此通過有效的實驗技術手段，對辣椒油中的有關羅丹明B殘留進行監控，以確保消費者對辣椒油消費的安全具有重要意義。
本實驗通過優化前處理方法建立了羅丹明B在辣椒油中的高效液相色譜的檢測方法。
實驗部分
儀器、試劑與材料
主要儀器設備
高效液相色譜儀（紫外檢測器）；
博納艾杰爾12位負壓SPE裝置。
試劑材料
丙酮、甲醇、正己烷為色譜純；實驗用水為超純水；羅丹明B標準品（純度99%）；
一次性無菌注射器；Nylon針式過濾器(0.45 µm，直徑13 mm)；
Cleanert Alumina-N固相萃取柱：2000 mg/6 mL
樣品制備
樣品提取
稱取1 g辣椒油于40 mL玻璃瓶中，加入10 mL 20%丙酮的正己烷溶液（V/V），振蕩搖勻后待凈化。
樣品凈化
先將小柱用6 mL正己烷活化平衡，然后將待凈化液過柱，棄去全部流出液，然后用10 mL 20%丙酮的正己烷溶液（V/V）進行淋洗，最后用10 mL 2%氨化甲醇（V/V）洗脫。收集洗脫液于40℃氮氣吹干，用1 mL甲醇溶解殘留物，過0.45 µm Nylon針式過濾器后待測。
以上凈化步驟可用卓睿全自動固相萃取儀完成。
實驗條件
液相條件
色譜柱：Venusil MP C18，5 µm，100 Å，4.6 × 150 mm
流動相：甲醇︰水=75︰25（V/V）
柱 溫：30℃
進樣量：20 µL
檢測波長：550 nm
結果與討論
實驗結果
由表1可知，采用固相萃取結合液相色譜法檢測羅丹明B，辣椒油基質加標回收率在90%以上，能夠滿足標準要求。
表1.辣椒油中羅丹明B加標回收實驗結果
物質名稱 | 保留時間 | 添加水平/mg/kg | 平均回收率 /% | RSD /% |
羅丹明B | 5.578 | 0.05 | 95.7 | 1.3 |
圖1. 0.05 µg/mL羅丹明B標準溶液液相色譜圖
圖2. 辣椒油基質空白液相色譜圖
圖3. 0.05 mg/kg辣椒油基質加標液相色譜圖
結論
本實驗建立了辣椒油中羅丹明B殘留量的檢測方法，并結合高效液相色譜對辣椒油中羅丹明B的含量進行了測定。對于加標量為0.05 mg/kg的辣椒油樣品，回收率在90% ~ 100%之間，符合實驗要求。
附：相關產品
產品名稱 | 規格描述 | 包裝數量 | 訂貨號 |
Venusil MP C18 | 5µm，100Å，4.6×150mm | 1支 | VA951505-0 |
Cleanert Alumina-N | 2000mg/6mL | 30支/包 | AL20006N |
Qdaura® 卓睿全自動固相萃取系統 | 4通道 | 1臺 | SPE-40 |
15位氮吹儀 | 15位 | 1臺 | NV15-M |
保護柱套 | 適用于4.6×10mm和2.1×10mm | 1支 | SH-100 |
直聯式保護柱芯 | 5µm，100Å；4.6×10mm | 4支/包 | VA950105-0S |
1.5 mL樣品瓶 | 短螺紋透明帶書寫處 32×11.6mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 mL樣品瓶蓋 | 9mm中心孔藍蓋，紅色橡膠/米色PTFE隔墊 45°Shore A; 1.0mm | 100/pk | 0915-1819 |
Nylon針式過濾器 | 單膜，13mm，0.45µm | 200個/包 | AS021345 |
一次性注射器 | 2 mL無針頭 | 100支/包 | LZSQ-2ML |
