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【藥典專欄】HPLC-ELSD分析芝麻油中的甘油三酯：GB/T 44614-2024與《中國藥典》方法對比分析
芝麻油作為一種常見的食用植物油和藥物輔料，其質(zhì)量和成分分析尤為重要。甘油三酯是芝麻油的主要成分，其組成直接影響油的營養(yǎng)價值、穩(wěn)定性和應(yīng)用性能。本文將介紹如何使用高效液相色譜法結(jié)合蒸發(fā)光散射檢測器（HPLC-ELSD）對芝麻油中的甘油三酯進行分析，并對比國家標(biāo)準GB/T 44614-2024《糧油檢驗，植物油中甘油三酯組成的測定，高效液相色譜法》與2025版《中國藥典》中芝麻油標(biāo)準的分析方法。
為何選擇HPLC-ELSD方法分析甘油三酯？
甘油三酯是甘油和三個脂肪酸形成的酯類化合物，廣泛存在于動植物油脂中。由于其結(jié)構(gòu)復(fù)雜、種類繁多，分析難度較大。目前分析甘油三酯的方法主要有高溫氣相色譜法、薄層色譜法、銀離子色譜法和高效液相色譜法等。其中，反相高效液相色譜法應(yīng)用廣泛，但在檢測器選擇上需要注意：
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紫外檢測器：甘油三酯在紫外區(qū)吸收很弱，靈敏度低；
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示差折光檢測器：雖為通用型檢測器，但不能用于梯度洗脫，靈敏度也不高；
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蒸發(fā)光散射檢測器：對甘油三酯靈敏度高，適用于梯度洗脫，是一種理想的通用型檢測器；
因此，HPLC-蒸發(fā)光散射檢測器成為分析甘油三酯組成的常用方法。
兩種標(biāo)準方法對比
1. GB/T 44614-2024與藥典方法對比
| GB/T 44614-2024方法 | 2025版《中國藥典》方法 | |
| 方法特點 | 適用于各類植物油中甘油三酯組成的測定 | 專門針對藥用芝麻油的質(zhì)量控制，要求更為嚴格 |
| 樣品前處理 | 標(biāo)準溶液：油酸甘油三酯用丙酮溶解并稀釋 | 供試品溶液：芝麻油用丙酮-二氯甲烷 (1:1) 溶解，配制成5 mg/mL溶液 |
| 色譜柱 | C18 (4.6 × 250 mm, 5 μm) | 兩根C18柱串聯(lián) (4.6 × 250 mm, 5 μm)，或等效單柱 |
| 流動相組成 | A-異丙醇，B-乙腈 | A-丙酮/二氯甲烷/乙腈 (5:15:80) |
| 梯度程序 | 0-14 min 20% A，35 min 70% A，40-50 min 20% A | 0 min 100% A，15-25 min 75% A，70-75 min 0-100% A，80 min 100% A |
| 流速 | 1.2 mL/min | 1.0 mL/min |
| 柱溫 | 45℃ | 35℃ |
| 檢測器參數(shù) | 蒸發(fā)溫度80℃，霧化溫度55℃，載氣流量2.5 L/min | 蒸發(fā)溫度85℃，霧化溫度55℃，載氣流量1.5 L/min |
| 主要應(yīng)用 | 常規(guī)植物油質(zhì)量分析 | 藥用芝麻油質(zhì)量控制 |
2. 2025版《中國藥典》對芝麻油中甘油三酯組成的要求
| 甘油三酯 | 含量百分比(%) | 中文名稱及組成說明 |
| LLL | 7.0 - 19.0 | 三亞油酸甘油酯 |
| OLL | 13.0 - 30.0 | 1,2-二亞油酸-3-油酸甘油酯 |
| PLL | 5.0 - 9.0 | 1,2-二亞油酸-3-棕櫚酸甘油酯 |
| OOL | 12.0 - 23.0 | 1,2-二油酸-3-亞油酸甘油酯 |
| POL | 6.0 - 14.0 | 1-棕櫚酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯 |
| OOO | 5.0 - 16.0 | 三油酸甘油酯 |
| SOL | 2.0 - 8.0 | 1-亞油酸-2-油酸-3-硬脂酸甘油酯 |
| POO | 2.0 - 10.0 | 1,2-二油酸-3-棕櫚酸甘油酯 |
注：L - 亞油酸，O - 油酸，P - 棕櫚酸，S - 硬脂酸
實際應(yīng)用案例
實驗儀器為配置蒸發(fā)光散射檢測器的依利特EClassical 3200L系統(tǒng)。
1、根據(jù)GB/T 44614-2024《糧油檢驗，植物油中甘油三酯組成的測定，高效液相色譜法》方法分析
如圖1所示，芝麻油樣品的色譜圖顯示出良好的分離，共檢測到40個色譜峰，通過等效碳數(shù)（ECN）進行定性。主要甘油三酯組成為ECN44（25.41%）、ECN46（22.24%）、ECN42（8.80%）等，符合優(yōu)質(zhì)芝麻油的組成特征。
圖1. 根據(jù)GB/T 44614-2024方法分析芝麻油樣品的色譜圖
2. 根據(jù)2025版藥典方法分析
藥典方法由于采用雙柱串聯(lián)，分離效果更加精細，如圖2所示，共檢測到21個明確的甘油三酯峰。通過與對照品色譜圖對比，成功識別了LLL、OLL、PLL、OOL、POL、OOO、SOL、POO等主要甘油三酯組分，各組分含量均符合藥典規(guī)定的范圍要求。
圖2. 根據(jù)藥典方法分析芝麻油樣品的色譜圖
兩種方法對比分析
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分離方式：GB/T 方法采用單柱分離，藥典方法采用雙柱串聯(lián)或者等效的單柱分離。
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分析時間：GB/T方法分析時間50分鐘，藥典方法80分鐘。
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應(yīng)用范圍：GB/T方法適用于各類植物油，藥典方法專門針對藥用芝麻油。
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定量要求：藥典方法有明確的含量限度要求，GB/T方法更側(cè)重于組成分析。
通過實際應(yīng)用驗證，依利特科技EClassical 3200L系統(tǒng)配合蒸發(fā)光散射檢測器，能夠很好地滿足兩種標(biāo)準方法的要求。高效液相色譜結(jié)合蒸發(fā)光散射檢測器是分析芝麻油中甘油三酯組成的有效方法。GB/T 44614-2024方法適用于常規(guī)植物油分析，而2025版《中國藥典》方法專門針對藥用芝麻油，具有更高的分離度和更嚴格的質(zhì)量要求。兩種方法各有優(yōu)勢，用戶可根據(jù)實際需求選擇合適的方法。