SiRNA脂質體擠出儀孔徑選擇方法

　　一、核心選擇原則
 

　　SiRNA脂質體擠出儀的孔徑選擇需圍繞脂質體目標粒徑、SiRNA 包封效率、制劑穩定性三大核心，遵循 “逐步縮小孔徑、匹配物料特性” 的原則，避免孔徑選擇過大導致粒徑不均，或過小造成擠出困難、脂質體破裂。
 

　　二、基于目標粒徑的孔徑匹配
 

　　明確脂質體最終目標粒徑(常規用于遞送的 SiRNA 脂質體粒徑多為 50-200nm)，選擇比目標粒徑略大的擠出膜孔徑作為起始，再逐步換用更小孔徑細化。
 

　　常見孔徑與目標粒徑對應關系：
 

　　目標粒徑 100-200nm：優先選用 200nm 孔徑擠出膜，后續可根據粒徑分布補用 100nm 孔徑校準；
 

　　目標粒徑 50-100nm：以 100nm 孔徑為起始，再用 80nm 或 50nm 孔徑二次擠出；
 

　　需精準控制粒徑分布(PDI<0.2)：建議采用 “大孔徑→中孔徑→小孔徑” 三級擠出，如 400nm→200nm→100nm。
 

　　三、結合物料特性調整孔徑
 

　　脂質體混懸液粘度：粘度較高(>5mPa?s)時，避免直接使用 50nm 以下小孔徑，需先通過 200-400nm 大孔徑降低粘度、分散團聚，再逐步縮小孔徑，防止膜堵塞或擠出壓力過高；
 

　　SiRNA 包封狀態：未完全包封的 SiRNA 脂質體，優先選用 100-200nm 孔徑，避免小孔徑擠壓導致 SiRNA 泄露；已穩定包封的制劑，可根據粒徑需求選用更小孔徑；
 

　　脂質材料硬度：剛性較強的脂質材料(如飽和磷脂類)，可適當選用略大孔徑分步擠出；柔性脂質材料(如不飽和磷脂)，可直接選用接近目標粒徑的孔徑，減少擠出次數。
 

　　四、孔徑選擇的實操技巧
 

　　首次使用未知特性的脂質體樣品：先進行預實驗，依次試用 400nm、200nm、100nm、50nm 孔徑，通過動態光散射(DLS)檢測每次擠出后的粒徑分布，確定最優孔徑組合；
 

　　擠出次數配合孔徑：大孔徑(200-400nm)擠出 2-3 次即可分散團聚，小孔徑(50-100nm)擠出 3-5 次，確保粒徑均一，避免單次擠出導致粒徑波動；
 

　　避免孔徑跨度過大：如直接從 400nm 跳到 50nm，易造成脂質體膜破裂、SiRNA 降解，建議相鄰孔徑差值不超過 200nm。
 

　　五、SiRNA脂質體擠出儀注意事項
 

　　擠出膜孔徑需與儀器適配，優先選用同一品牌的專用膜(如聚碳酸酯膜)，避免孔徑偏差影響效果；
 

　　長期使用后需檢查擠出膜完整性，若出現膜破損、堵塞，及時更換，避免影響粒徑控制精度；
 

　　不同批次脂質體物料可能存在特性差異，每次更換批次需重新驗證孔徑選擇的合理性，確保制劑一致性。