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        固相萃取儀裝置使用方法詳解

        閱讀:882發布時間:2025-7-15

          一、固相萃取儀核心原理與裝置組成
         
          固相萃取儀(SPE)通過固體吸附劑選擇性吸附液體樣品中的目標化合物,實現與基體及干擾物的分離,再經洗脫或解吸附富集目標物。其核心裝置包括:
         
          固相萃取柱:由醫用聚丙烯柱管、多孔聚丙烯篩板(20μm)及填料(40-60μm或80-100μm)組成,常見規格如100mg/1ml、500mg/3ml等。
         
          真空系統:包括真空泵、壓力表、緩沖瓶,用于提供負壓促進樣品通過萃取柱。
         
          收集裝置:試管架(12/24位可調)、收集瓶,用于收集洗脫液。
         
          輔助部件:大體積上樣器、StopCock閥(精確控制流速)、防交叉污染裝置。
         
          二、操作前準備:細節決定成敗
         
          環境與安全
         
          確保操作臺穩固、無積水、無酸堿腐蝕,遠離空調直吹(防止儀器老化)。
         
          佩戴防護手套及護目鏡,核查實驗室穩壓電源,檢查廢液收集瓶容量。
         
          樣品與試劑準備
         
          樣品處理:
         
          液相樣品:直接進樣。
         
          固態樣品:溶解后過濾(0.45μm濾膜)、離心或稀釋至合適濃度。
         
          試劑選擇:
         
          萃取柱:根據目標物性質選擇填料(如C18柱適用于非極性物質,NH2柱適用于酸性化合物)。
         
          活化溶劑:反相柱用甲醇(6倍柱體積)→ 水(4倍柱體積);正相柱用樣品所在有機溶劑;離子交換柱用3-5ml去離子水。
         
          設備檢查
         
          檢查真空泵輸出壓力(<0.1MPa,負壓>-0.09MPa),確認各通道密封墊無異物。
         
          獨立控制通道需提前確認開啟狀態,避免壓力異常。
         
          三、操作步驟:標準化流程與關鍵參數
         
          活化萃取柱
         
          目的:去除雜質,創造適宜溶劑環境。
         
          方法:依次用甲醇(6倍柱體積)、水(4倍柱體積)以0.5-1ml/min流速通過萃取柱,觀察篩板表面呈水平光滑浸潤面。
         
          上樣
         
          方法:將樣品溶液緩慢加入萃取柱,控制總上樣量≤柱體積2000倍(如1ml柱體最多處理2L樣品)。
         
          流速:生物檢材類≤5ml/min,工業廢水類≤15ml/min,每通過300ml暫停檢查液壓表指針是否穩定在綠色區。
         
          收集:目標化合物隨樣品基液流出時開始收集,雜質被保留在柱上。
         
          淋洗(除雜)
         
          目的:去除干擾物,保留目標物。
         
          方法:用5ml含0.1%乙酸水溶液三次過柱,流速與上樣階段一致。
         
          洗脫
         
          目的:用小體積溶劑洗脫目標物。
         
          方法:
         
          單體系洗脫:75% 0.35mol/L甲醇 + 25%丙酮混合溶液,流速調低至初始階段65%。
         
          雙體系洗脫:交替使用兩種溶劑,記錄各組接收管編號。
         
          洗脫體積:避免過大(可通過減少溶劑用量或縮短時間控制)。
         
          后處理
         
          洗脫液處理:干燥(氮氣吹干)、重溶(甲醇/水)或濃縮(旋轉蒸發)。
         
          柱再生:蒸餾水循環沖洗30分鐘 → 60%甲醇維持45分鐘,拆除后置于真空干燥器保存。
         
          四、操作后維護:延長設備壽命
         
          清潔與存放
         
          清潔:用去離子水或清洗劑沖洗管路,直至無殘留。
         
          存放:防潮、防塵、避光,長期未使用需啟用自動排液模式消除泵內存液,每月啟動自檢程序防止密封件粘連。
         
          數據記錄與關機
         
          登記機時、機型碼、樣品pH參數至《使用登記本》。
         
          關閉主電源總控斷路器,核查關機指示燈狀態。
         
          五、常見問題與解決方案
         
          萃取柱堵塞
         
          原因:樣品含顆粒物或填料松動。
         
          解決:用甲醇反向沖洗(低流速),若無效則更換萃取柱。
         
          洗脫效果差
         
          原因:洗脫溶劑選擇不當或流速過快。
         
          解決:優化洗脫條件(如增加甲醇比例),降低流速至初始階段65%。
         
          壓力異常
         
          原因:密封墊漏氣或通道未關閉。
         
          解決:檢查密封墊平整性,關閉無需使用的通道。

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