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科學(xué)識別超濾離心管出現(xiàn)的問題并采取針對性措施是實現(xiàn)長期穩(wěn)定的關(guān)鍵
閱讀:143發(fā)布時間:2026-1-7
超濾離心管是一種集離心與分子篩分功能于一體的實驗室耗材,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)濃縮、脫鹽、緩沖液置換及核酸純化等生物化學(xué)操作。其核心為內(nèi)置截留分子量的超濾膜,通過離心力驅(qū)動小分子透過膜而大分子被截留。盡管操作簡便,但在實際使用中可能會因選型錯誤、操作不當(dāng)或保存不善導(dǎo)致回收率低、堵塞、破裂或交叉污染等問題,嚴(yán)重影響實驗結(jié)果。科學(xué)識別超濾離心管出現(xiàn)的問題并采取針對性措施,是實現(xiàn)長期穩(wěn)定過濾的關(guān)鍵。

一、濃縮效率低或無法濃縮
原因:膜孔徑(MWCO)選擇過大、樣品黏度過高、離心參數(shù)不足。
解決方法:
確保目標(biāo)分子量≥2–3倍MWCO(如50kDa蛋白應(yīng)選10K或30K管);
高黏度樣品(如細(xì)胞裂解液)先低速預(yù)離心去除碎片,或稀釋后處理;
按說明書設(shè)置離心力(通常1,000–14,000×g)和時間,避免過低轉(zhuǎn)速導(dǎo)致通量不足。
二、濾膜堵塞或流速驟降
原因:樣品含顆粒雜質(zhì)、脂質(zhì)或高濃度蛋白聚集。
解決方法:
上樣前用0.45μm或0.22μm濾器預(yù)過濾;
對含脂樣品,加入適量去垢劑(如0.1%Tween-20)減少膜吸附;
采用“間歇離心法”:離心5分鐘→暫停1–2分鐘→再離心,緩解濃差極化。
三、目標(biāo)物回收率低
原因:非特異性吸附、膜結(jié)合、殘留體積過大。
解決方法:
選用低吸附型超濾管(如帶親水涂層的RC膜);
濃縮后用少量原緩沖液反向洗滌濾膜上表面,提高洗脫率;
選擇“死體積”小的型號(部分產(chǎn)品可低至<5μL),減少樣品滯留。
四、離心管破裂或漏液
原因:超速離心、管體老化、未配平。
解決方法:
嚴(yán)格遵守離心力限制(標(biāo)注于管壁),切勿超限使用;
檢查管體是否有劃痕、白化或脆化,一次性耗材禁止重復(fù)高壓滅菌;
離心前務(wù)必對稱配平(質(zhì)量差≤0.1g),使用適配套管。
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