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        技術(shù)文章

        VRBA與VRBGA的比較與探討

        閱讀:205          發(fā)布時(shí)間:2025-12-30

        一、簡介

          在實(shí)際工作中,經(jīng)常有人將VRBA和VRBGA混淆,甚至有人認(rèn)為兩者是一種培養(yǎng)基,在購買、使用過程中造成錯(cuò)誤。本文主要對(duì)這兩種培養(yǎng)基的使用和原理等方面做出詳細(xì)說明,并對(duì)相關(guān)問題進(jìn)行探討。


        二、比較

          兩種培養(yǎng)基的異同情況如表1。

        表1  VRBA和VRBGA的比較表


        比較項(xiàng)目

        VRBA

        VRBGA

        中文名字

        結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂

        結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂

        英文

        Violet Red Bile Agar

        Violet Red Bile Glucose Agar

        貨號(hào)

        HB0114

        HB0176-4

        用途

        用于大腸菌群的固體平板檢測

        用于腸桿菌科的分離培養(yǎng)

        成分

        (g/L)

        酵母浸粉 3.0

        蛋白胨 7.0

        氯化鈉 5.0

        乳糖 10.0

        3號(hào)膽鹽 1.5

        結(jié)晶紫 0.002

        中性紅 0.03

        瓊脂 15.0

        pH值7.4±0.1 25℃

        酵母浸粉 3.0

        蛋白胨 7.0

        氯化鈉 5.0

        葡萄糖 10.0

        3號(hào)膽鹽 1.5

        結(jié)晶紫 0.002

        中性紅 0.03

        瓊脂 12.0

        pH值7.4±0.2 25℃

        成分區(qū)別

        乳糖

        葡萄糖

        原理

        蛋白胨提供氮源,碳源,維生素和礦物質(zhì);酵母浸粉能夠提供微生物生長特別需要的B族維生素;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;膽鹽和結(jié)晶紫能抑制樣品中的革蘭氏陽性菌;中性紅為指示劑;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

        乳糖為weiyi發(fā)酵底物

        葡萄糖為weiyi發(fā)酵底物

        培養(yǎng)條件

        36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h

        質(zhì)

        大腸

        埃希

        氏菌

        紫紅色菌落,可有膽鹽沉淀環(huán)

        紅色菌落,有膽鹽沉淀環(huán)

        弗氏

        檸檬

        酸桿

        紫紅色菌落,可有膽鹽沉淀環(huán)

        紅色菌落,有膽鹽沉淀環(huán)

        陰溝腸桿菌

        紫紅色菌落,可有膽鹽沉淀環(huán)

        紅色菌落,有膽鹽沉淀環(huán)

        鼠傷

        寒沙

        門氏

        紅色菌落,無膽鹽沉淀環(huán)

        紅色菌落,有膽鹽沉淀環(huán)

        福氏

        志賀

        氏菌

        紅色菌落,無膽鹽沉淀環(huán)

        紅色菌落,有膽鹽沉淀環(huán)


          通過比較,我們可以看到兩種培養(yǎng)基的主要成分幾乎一模一樣:蛋白胨提供氮源、碳源、維生素和礦物質(zhì);酵母浸粉提供微生物生長特別需要的B族維生素;膽鹽和結(jié)晶紫能抑制樣品中的革蘭氏陽性菌;中性紅為指示劑;瓊脂是凝固劑。

          兩者的區(qū)別在于糖類底物的差異:VRBA的底物是乳糖,而VRBGA的底物是葡萄糖。質(zhì)控菌菌落特征有差別:不同的菌用兩種培養(yǎng)基傾注培養(yǎng),形成的菌落特征會(huì)有差異(如表1、圖1、圖2)。


        三、討論

          通過上面的比較,可以看出這是兩款不同用途的培養(yǎng)基,為了更好地理解這兩款培養(yǎng)基,首先要弄清“大腸菌群"和“腸桿菌科"這兩個(gè)概念。

          有關(guān)大腸菌群,《GB 4789.3-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)》中將其定義為“在一定培養(yǎng)條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌"。“大腸菌群"并不是一個(gè)細(xì)菌分類學(xué)概念,也就是說,在正規(guī)分類學(xué)譜系中,是找不到“大腸菌群"這個(gè)定義的,普遍定義的大腸菌群通常包括以下幾個(gè)屬:腸桿菌屬(Enterobacter)、檸檬酸菌屬(Citrobacter)、埃希氏菌屬(Escherichia)、克雷伯氏菌數(shù)(Klebsiella)、哈夫尼亞菌屬(Hafnia)。

          有關(guān)腸桿菌科,《GB 4789.3-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)?zāi)c桿菌科檢驗(yàn)》中是這樣定義的,“在給定條件下發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、氧化酶陰性的需氧或兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌"。腸肝菌科(Enterobacteriaceae family)是嚴(yán)格的細(xì)菌分類學(xué)定義,包括克羅諾菌屬(Cronobacter)、沙門氏菌屬(Salmonella)、腸桿菌屬(Enterobacter)、檸檬酸菌屬(Citrobacter)、埃希氏菌屬(Escherichia)、志賀菌屬(Shigella)等等。

          腸桿菌科與大腸菌群最大的區(qū)別在于,它不能在37°C下發(fā)酵乳糖,進(jìn)而產(chǎn)酸或產(chǎn)氣。因此,像沙門氏、志賀菌、變形桿菌等這些腸桿菌科中最重要的若干門類都被排除在大腸菌群集群以外。

          正是因?yàn)樯厦嫠龅脑颍琕RBA(結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂)內(nèi)含乳糖作為weiyi糖類底物,專門用于檢測大腸菌群。典型大腸菌群細(xì)菌在VRBA上呈現(xiàn)紫紅色菌落,有時(shí)帶膽鹽沉淀環(huán)。非大腸菌群如沙門氏菌屬的菌落呈現(xiàn)紅色,無膽鹽沉淀環(huán)(如圖1)。當(dāng)待測產(chǎn)品中本身含有乳糖以外的糖類時(shí),這些糖類有可能伴隨進(jìn)入培養(yǎng)酵解過程,導(dǎo)致非大腸菌群產(chǎn)生假陽性結(jié)果,這種情況需要對(duì)菌落進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。

        圖1 不同的菌種在VRBA上的生長特征

          VRBGA(結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂)培養(yǎng)基的底物是葡萄糖,能支持各種腸桿菌科成員的普遍生長,典型腸桿菌科在VRBGA上呈現(xiàn)紅色菌落,帶膽鹽沉淀環(huán)(如圖2),但不能用來鑒別能酵解乳糖的菌屬和不能酵解乳糖的菌屬(如沙門氏)。

        圖1 不同的菌種在VRBGA上的生長特征

          基于上面的區(qū)別和討論,實(shí)驗(yàn)人員在使用這兩款培養(yǎng)基時(shí),要加以區(qū)別,避免混淆。另外,大腸埃希氏菌E.coli是大腸菌群的代表菌屬,通常簡稱為大腸桿菌,還有些人對(duì)大腸桿菌、大腸菌群和糞大腸菌群這幾個(gè)概念也容易混淆。

          




        注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。


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