技術實操丨從“開窗”到“探境”：GRIN Lens植入術引領深層腦觀測新階段

溫馨提示

1. 手術器械：兩把精細鑷、一把雙頭微型刮鏟、一把彈簧剪。

2. 實驗耗材：準備實驗所需耗材，配制含 1% 頭孢曲松鈉的生理鹽水。

3. 器械消毒：術中所有使用的器械或植入物使用前需消毒處理，可以用 75% 乙醇消毒，有條件的可以定期高壓滅菌。

4. 手術臺消毒：手術臺使用前應用 75% 乙醇擦拭消毒，手術臺應墊無菌布、干凈的吸收墊或毛巾，每次手術結束后須更換這些材料。

1. 將小鼠放入麻醉劑倉室內進行誘導麻醉，氣體流量與麻醉刻度根據實驗室的氣麻機設置。當小鼠出現明顯呼吸減慢、四肢放松，則表明小鼠已進入麻醉狀態。

2. 將麻醉后的小鼠固定于腦立體定位儀上，并維持麻醉，在手術過程中時刻注意觀察小鼠呼吸。

1. 將紅霉素眼膏均勻涂抹于小鼠眼部，用量應完全覆蓋小鼠眼部，使眼部不暴露在外。

2. 使用醫用棉簽蘸取脫毛膏，逆著毛發生長的方向均勻涂抹于毛發根部，約2分鐘用棉簽擦拭脫去頭部毛發。

3. 使用醫用棉簽蘸取生理鹽水，將小鼠頭部殘留的脫毛膏清洗干凈。

4. 使用碘伏擦拭清潔脫完毛的皮膚。

1. 使用彈簧剪剪去小鼠頭皮，充分暴露顱骨區域。

2. 將所暴露顱骨上的黏膜和兩處肌肉連接處多余脂肪全部剝去。

3. 使用微型雙頭刮鏟刮除顱骨表面殘余黏膜、結締組織等。

4. 持洗耳球，將顱骨表面吹至完全干燥。

1. 以病毒注射孔或定位位點為中心進行擴孔，擴孔尺寸比 GRIN Lens 直徑稍大，保證透鏡能順利植入。

2. 將顱骨鉆速度調至低檔，持顱骨鉆輕輕打磨，使用洗耳球輕輕吹去碎屑，重復此操作直至打磨至硬腦膜。

1. 使用精細鑷將植入孔周圍碎骨片完全挑出。

2. 持精細鑷將硬腦膜慢慢地揭開。
   

1. 準備內徑比 GRIN Lens 直徑稍大的毛細玻璃管，將 GRIN Lens 的一端和毛細管的結合位點用502膠水粘住，等待膠水干燥后觀察 GRIN Lens 和毛細管是否保持相對水平，防止插入角度產生偏差，并觀察連接是否水平。

2. 將粘住 GRIN Lens 的毛細管安裝到夾持器上。

3. 將 GRIN Lens 的夾持器安裝在立體定位儀上，重新進行調平定位。

1. 植入 GRIN Lens，緩慢降至目標腦區上方后停10分鐘，待組織回彈。

2. 使用生物組織膠填充至植入的 GRIN Lens 與顱骨間的縫隙，并將生物組織膠在顱骨上涂滿一層以隔絕顱骨與外部環境，避免后續操作對小鼠顱骨的刺激。待生物膠干透后，再涂一層406膠水。

3. 等待406膠水干透后，使用502膠水溶解混勻牙科水泥，使用牙科水泥圍繞 GRIN Lens 對暴露的顱骨進行薄薄一層均勻的覆蓋，用于初步固定GRIN Lens，等待牙科水泥固化。  

1. 等待牙科水泥固化后，使用制備好的槍尖向毛細玻璃管內注射解膠劑（如丙酮），溶解 GRIN Lens 和毛細管之間的502膠水后，可以升高夾持器，將毛細玻璃管與 GRIN Lens 分離。

2. 用牙科水泥將頭件粘貼在小鼠顱骨之上，頭件中心對齊 GRIN Lens 植入點。使用牙科水泥充分覆蓋暴露的 GRIN Lens 以及端面。

3. 取下小鼠，用牙科水泥充分填補與頭件之間的縫隙或連接薄弱處，加強頭件穩固性。

4. 等待牙科水泥干透后，把小鼠放入保溫箱，等待小鼠蘇醒。