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        技術文章

        SLS 常見問題解答——德拜圖

        閱讀:174          發布時間:2025-12-4
        SLS 常見問題解答——德拜圖

        德拜圖是一種常見的單角度靜態光散射(SLS)測量技術,它使用戶能夠測量小分子聚合物和膠體(通常Rg < 12 nm)的絕對重均分子量,此時高分子的分子尺寸相對于實驗所用激光器的波長可忽略不計(Rg << λ)。而對于大分子,尤其是中高分子量的聚合物,仍需要進行多角度光散射測量來確定絕對重均分子量。

        SLS 常見問題解答——德拜圖


        01

        靜態光散射方法介紹

        SLS 常見問題解答——德拜圖

        與動態光散射(DLS)不同,靜態光散射是基于光子計數,所得的光子計數率反映了在給定檢測角度下散射光的總光量。

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        02

        雙外推法(Zimm圖)

        SLS 常見問題解答——德拜圖

        最著名的靜態光散射方法之一便是Zimm圖,這是一種針對濃度和散射角度進行的雙重外推,除了能得出重均分子量外,濃度相關的數據還能得出第二維里系數(A2),而角度相關的測量結果則能得到回旋半徑(Rg),回旋半徑反映了聚合物的分子大小。回旋半徑越大,角度依賴性就越顯著。


        SLS 常見問題解答——德拜圖



        將濃度和角度分別外推為零時,得到的截距即為重均分子量的倒數(1/Mw)。



        03

        單外推法(Debye圖)

        SLS 常見問題解答——德拜圖

        靜態光散射是一種極其強大的用于測量結構參數(如分子大小、絕對重均分子量)的方法,它通常僅適用于諸如 MALS 、廣光動靜態光散射儀系統等儀器。為了使這種方法能在更常見的臺式光散射儀器上得以應用,布魯克海文在納米粒度及Zeta電位分析儀上搭載了“Molecular Weight Debye Measurement"測量程序,采用Debye原理,利用小分子幾乎不具有角度依賴性的這一特點,使用單角度直接測量小分子的絕對重均分子量。


        04

        在 NanoBrook系列儀器上測試Debye圖

        SLS 常見問題解答——德拜圖

        這是 NanoBrook 系列儀器上支持的一種靜態光散射(SLS)測試形式,在90°角進行直角散射測量。

        SLS 常見問題解答——德拜圖

        只需簡單做如下準備就可以完成測量:

        1、一個石英比色皿

        2、幾毫升過濾后的甲苯

        3、配置4-5種不同濃度的樣品

        4、溶液的dn/dc 值

        SLS 常見問題解答——德拜圖



        上圖是對低分子量聚乙烯吡咯烷酮的測量,得出其分子量約為50 kDa,A2 值為 5.9×10-4 cm3mol/g2。



        折射率增量(dn/dc)隨波長而變化,特別是對于聚合物而言,其值會因溶劑而發生變化。該數值可以從一些參考手冊中查閱獲得。蛋白質的 dn/dc 值通常變化較小,因此往往更容易估算。在水溶液中典型的球狀蛋白質的 dn/dc 值在 0.179 至 0.188 ml/g之間。

        05

        結論

        SLS 常見問題解答——德拜圖

        在NanoBrook系列儀器上可通過Debye圖測定分子量。該方法對半徑小于12 nm的大分子(包括球狀蛋白、膠體及樹枝狀聚合物)均能獲得精確結果。此外,Debye圖通常也適用于分子量低于100 kDa的無規線團聚合物。


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