重組人干細胞因子(rhSCF)是支持造血干細胞體外擴增的核心細胞因子，其產量與質量直接決定下游應用成本與效果。中國倉鼠卵巢(CHO)細胞因其人源化翻譯后修飾能力，成為rhSCF生產的常選宿主。高效表達細胞株的構建與篩選是工藝開發的關鍵第一步。
構建策略通常包括：選擇強啟動子(如CMV或EF-1α)、優化信號肽序列以促進分泌、引入抗凋亡基因(如Bcl-2)延長培養周期，并通過轉座子系統(如Sleeping Beauty)或定點整合技術實現穩定高拷貝插入。隨后，采用有限稀釋法或FACS分選獲得單克隆細胞株。
篩選階段需建立多維評價體系：首先通過ELISA初篩上清中rhSCF濃度；其次利用TF-1細胞增殖實驗評估其生物活性；再結合qPCR檢測mRNA水平與基因拷貝數相關性；最后在搖瓶或微生物反應器中評估其在補料分批培養下的長期表達穩定性。高產株往往具備高比生產率(qp)與低代謝副產物積累特性。
近年來，CRISPR/Cas9介導的基因組編輯進一步提升了篩選效率，例如敲除蛋白酶基因以減少產物降解，或增強糖基化通路基因以改善重組人干細胞因子穩定性。最終獲得的GMP級主細胞庫(MCB)需經過全面檢定，確保無外源因子污染與遺傳穩定性。該過程不僅提升重組人干細胞因子的可及性，也為其他難表達細胞因子的開發提供范式。
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